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NIBSC 抑制素 B(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)品)

產(chǎn)品時(shí)間:2022-03-04

簡要描述:

NIBSC 96/784 抑制素 B(WHO國際標(biāo)準(zhǔn)品)該制劑含有抑制素 A、抑制素 B 和抑制素 ? 亞基的混合物,在稀釋于含有 Tris (25mM)、氯化鈉 (0.85% w/v)、人血清白蛋白 (0.5% w/v) 和Triton X100 (0.1% v/v) 被冷凍干燥和二次干燥,并在一項(xiàng)國際合作研究中作為抑制素 B 的候選 WHO 參考試劑進(jìn)行評(píng)估


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世界衛(wèi)生組織參考試劑

抑制素 B,人類

NIBSC 96/784


酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎細(xì)胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細(xì)胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態(tài))
五.表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和,離心后取上清,含少量DNA。

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