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NRC標(biāo)準(zhǔn)品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素的制備
  • 更新日期:2023-08-03      瀏覽次數(shù):395
    • 從培養(yǎng)的塔瑪亞歷山大藻中提取N-氨基磺?;谞钕偎?2和-3,并化學(xué)轉(zhuǎn)化為GTX2和GTX3混合物,使用制備規(guī)模色譜法進(jìn)行純化[2]。將純化的GTX2&3在真空下干燥并溶解在過濾的0.5mM HCI水溶液中以得到儲(chǔ)備溶液。通過500 MHz質(zhì)子核磁共振(NMR)光譜、LC-ox-FLD[3](Figure 1)、LC-MSIMS[4](Figure 2和Figure 3)、毛細(xì)管電泳紫外檢測(CE-UVD)[5]和液相色譜化學(xué)發(fā)光氮檢測(LC-CLND)[6]檢查毒素的純度。

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      在過濾(0.2 um)中制備CRM-GTX2和3-d溶液,并在pH 3.4下脫氣0.5 mM HCl,并將其分配到預(yù)先填充氬氣的琥珀安瓿中,然后立即火焰密封。每個(gè)安瓿含有約0.5 mL溶液。


      NRC標(biāo)準(zhǔn)品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素同質(zhì)性

      從整個(gè)灌裝系列中選擇了代表性數(shù)量的CRM-GTX283-d安瓿,并通過LC-ox-FLD測量GTX2&3濃度。使用ANOVA評估數(shù)據(jù)。


      NRC標(biāo)準(zhǔn)品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素穩(wěn)定性

      研究表明,GTX2和3溶液儲(chǔ)存在+4°C的密封安瓿中,具有良好的長期穩(wěn)定性,在一年內(nèi)未觀察到任何可檢測到的分解。溶液在冰箱(-12℃或更低)中儲(chǔ)存時(shí)也很穩(wěn)定。已確定GTX2&3在室溫下具有良好的穩(wěn)定性,在分析方法的不確定度范圍內(nèi)一個(gè)月內(nèi)未觀察到任何可檢測到的分解(LC-MS,單一溶液重復(fù)注射的RSD<1%;n=6)。


      NRC標(biāo)準(zhǔn)品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素不確定性

      考慮并量化了與CRM-GTX283-d表征相關(guān)的所有合理誤差源。包括與所使用的兩種分析方法相關(guān)的組合不確定度分量(Lehar)。總體不確定度估算(UcRw)包括與批次表征(uchar)、儲(chǔ)存期間不穩(wěn)定性(usab)和瓶間變化(usom)相關(guān)的不確定度[8-11]。表3列出了這些組件,并按如下方式組合和擴(kuò)展:

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