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胎牛血清如何正確存放與解凍?
  • 更新日期:2023-07-24      瀏覽次數(shù):544
    • 胎牛血清在科研市場上應(yīng)用廣泛相信大家都知道。但對于胎牛血清的使用及保存,并不是所有人都那么清楚,景源實驗就以胎牛血清的儲存、常見問題及處理方法進(jìn)行分析:


      一、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

      未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。溶解后建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。


      二、血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?

      1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;

      2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時;

      3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;

      4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。


      三、若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處理?

      胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。

      解凍胎牛血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。


      四、如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?

      1.解凍時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一;

      2.分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡);

      3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍,較大的溫差,易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀;

      4.切勿將血清置于37℃過長時間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩(wěn)定的組分也會因此受到影響,最終降低血清的品質(zhì);

      5.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟;

      6.若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且保持搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。

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